所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。 取离体的动物组织,器官或细胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞,配置形成细胞悬液。 制备动物细胞培养液体培养基(需加入血清,保证无菌无毒),将细胞接种至培养基,放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。 当细胞增殖达到一定程度,出现接触抑制现象时,用胰蛋白酶再次处理,并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。 依照计数结果,分瓶培养,进行传代培养。获得细胞系或细胞株。